蛋白质被酶切后还有活性吗

本人酶切一直切不下来为什么
　　可能在酶切之前或期间降解目标DNA，使酶切无法得到预期结果；其他物质污染：底物中可能含有酶活抑制剂，如SDS十二烷基硫酸钠、酚、EDTA等，这些物质会抑制酶的活性，导致酶切失败。底物纯度不够：对于底物如质粒DNA，纯度很重要。如果有蛋白质、RNA残留会影响酶切。当质粒。

19凋亡蛋白酶对底物的酶切部位是
　　A[题解]凋亡蛋白酶是一组对底物天冬氨酸部位有特异水解作用，此部位是凋亡蛋白酶的酶切部位。

酶切反应是化学反应还是生物反应
　　两者都有！所有的酶反应都是化学反应有新物质生成，另外酶的本质大部分又是蛋白质，少数是脂质及其他，因而也是生物反应

GST融合蛋白凝血酶酶切问题
　　GST融合蛋白凝血酶酶切可能出现以下问题：凝血酶切错位置：有报道显示，GST融合蛋白经凝血酶酶切后，某些活性消失，但另外一方面的活性仍在。通过质谱分析发现，分子量比理论上的少了800多，推测可能是凝血酶切错了位置，多切了几个氨基酸，而这几个氨基酸对活性至关重要。凝血。

做重组质粒时转化提质粒后PCR验证为阳性但是酶切却切不出来
　　自然不会被蛋白质细胞器基因组DNA沉淀带走，最后和阴性质粒一起再接受PCR，所以出了假阳性。这也是为什么菌落PCR的假阳性远远高于菌液PCR的原因，一般菌液PCR不容易遇到假阳性的，尤其做了蓝白筛选或者用了带有致死基因的克隆载体，不过送去测序之前都最好经过酶切确认。

质粒酶切后无条带是什么原因
　　质粒酶切后无条带的原因包括：非特异性酶切：限制性内切酶在某些条件下可能会在非特定位点切割DNA，这被称为星形活性。为了减少恒星活动，请确保使用推荐的缓冲液，并避免甘油浓度过高、酶浓度过高和延长培养时间。DNA制备中的污染物：DNA制备中残留的RNA、蛋白质或其他。

11凋亡蛋白酶对底物的酶切部位是
　　A[题解]凋亡蛋白酶是一组对底物天冬氨酸部位有特异水解作用，此部位是凋亡蛋白酶的酶切部位。

碱裂解提取质粒DNA可以酶切吗
　　碱裂解法是提取质粒的最常用也最有效的方法，是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异达到分离目的.原理：高pH使质粒DNA和染色体DNA变性，同时沉淀蛋白质.再将pH值调至中性，质粒DNA较小，很容易复性成双链.而染色体DNA较大，缠结成网状不溶物质，从而可以通过离心除。

连接转化后提质粒做酶切可以切出带做质粒PCR却P不出来为什么
　　不会被蛋白质、细胞器或基因组DNA沉淀带走，因此会与阴性质粒一起在后续的PCR中产生假阳性结果。连接问题：如果质粒构建失败，即连接。如果质粒上有多个酶切位点，可能会导致酶切后片段变小，从而影响电泳结果。综上所述，当遇到“连接转化后提质粒做酶切，可以切出带，做质粒。

为什么蛋白一般用trypsin酶切
　　因为trypsin酶可以通用的切割蛋白质的肽键，破坏蛋白质空间结构。胰蛋白酶为肽链内切酶，对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用，可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸。由于血清中含有非特异性抑肽酶，故胰蛋白酶不会消化正常组织，而能分解黏痰、。