考马斯亮蓝发和BCA法测得的蛋白质含量差别怎么这么大
在酸性溶液中与蛋白质结合后,其最大吸收峰会发生红移,并且颜色的强度与蛋白质浓度成正比。而BCA法则是基于铜离子与蛋白质中的二硫键和游离氨基发生螯合反应,形成紫色复合物,该复合物在600nm处的吸光度与蛋白质浓度呈正比。对不同蛋白质的灵敏度不同:考马斯亮蓝法对不。
考马斯亮蓝测定蛋白的结果受蛋白的分子量大小的影响吗
受影响考马斯亮蓝测定蛋白的结果会受到蛋白分子量大小的影响。考马斯亮蓝法测蛋白时,分子量小的多肽可能会测不出来。这是因为考马斯亮蓝能够与蛋白中的碱性氨基酸结合,而分子量较小的多肽可能不含或含有的碱性氨基酸较少,导致结合不足,从而影响检测结果。
考马斯亮蓝G250蛋白试剂能保存多久
考马斯亮蓝G250蛋白试剂的贮备液可以存放6个月以上,而应用液不宜长时间存放,一旦出现絮状沉淀则不可用。考马斯亮蓝G250蛋白试剂是一种常用的蛋白质染色试剂,它的保存期限取决于具体的类型和保存条件。一般来说,贮备液可以在常温下存放6个月以上,而应用液则不适宜长时间。
考马斯亮蓝测蛋白质标准曲线测定为什么很难成线性
试剂问题:使用的考马斯亮蓝试剂可能存在质量问题,或者在使用过程中受到了污染,这也可能导致标准曲线不成线性。仪器问题:使用的分光光度计等仪器可能存在故障或者校准不当,这也可能导致标准曲线不成线性。蛋白质本身的问题:不同的蛋白质与考马斯亮蓝的结合能力可能不同。
采用考马斯亮蓝测定样品中的蛋白质浓度常用来做标准物质的有
采用考马斯亮蓝测定样品中的蛋白质浓度,常用来做标准物质的有结晶牛血清蛋白和γ-球蛋白。考马斯亮蓝测定蛋白质浓度,是利用蛋白质-染料结合的原理,定量测定微量蛋白浓度快速、灵敏的方法。考马斯亮蓝G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置λmax。
考马斯亮蓝法和分光光度法法测蛋白浓度为什么不相等
考马斯亮蓝法和分光光度法法测蛋白浓度不相等的原因是两者的机理不同,导致准确性有所差异。分光光度法的机理是氨基酸残基在280nm处有光吸收,通过OD280换算蛋白浓度。而考马斯亮蓝法的机理是考马斯亮蓝G250与蛋白有较强的非共价结合,通过OD600换算蛋白浓度。分光光度。
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中使用的水一定是蒸馏水吗为什么
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中,使用的水最低要求是蒸馏水,更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制,标准曲线的制作都要用到水。如果不是使用蒸馏水,可能水里面会有一些游离的离子或者电解质,会影响试剂配制的准确性,干扰实验结果。而水中残留。
求化学大神告知考马斯亮蓝测定蛋白质含量怎么制作标准曲线标准
实验七考马斯亮蓝G250法测定的蛋白质含量_百度文库https://wenku.baidu.com/view/40380c0e76c66137ee0619c8.html
怎样配制考马斯亮蓝G250蛋白染色剂
您好!您确定是是考马斯亮蓝G250,这个是用来蛋白定量的,一般染色用的是R250。考马斯亮蓝G250的配制:称取100mg考马斯亮蓝G250,溶于50mL90%乙醇中,加入85%的磷酸100mL,最后用蒸馏水定容到1000mL。此溶液在常温下可放置一个月。来源:百度文库。百度教育团队【海。
影响考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的因素有哪些
而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。反应时间:蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。因此测定时,不可放置太长时间,否则将使测定结果偏低。某些物质的存在:Mg²⁺离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖等也。