如何检测WB实验中的蛋白质表达

怎样定位一个跨膜蛋白基因的胞外段序列
　　首先，现在跨膜蛋白的预测比较成熟，有很多网站都可以预测，有多少段跨膜序列，哪段在胞外都是可以预测的。你也可以跟人的比较。其次，就是做实验验证了。比如，将个tag连在C端，转质粒进去表达。收细胞，WB。如果用胰酶消化WB检测不出条带而细胞刮收的细胞WB检测出条带，那就证。

RTPCRWesternblot和ELISA三者的区别
　　从而反映基因的表达情况。Westernblot是一种用于检测和半定量蛋白质表达水平的技术，它通过抗原抗体反应来确定特定蛋白质的存在及其分。WB一次处理的样品数量有限，大约10-20个样品，而且操作过程中可能会遇到非特异性条带、膜本底差等问题。相比之下，ELISA可以处理96孔板。

急切求解WBRTPCRIHC生物学专业名词的详细解释拜托
　　RT-PCR广泛应用于研究基因表达水平、病毒载量测定以及疾病诊断等领域。ImmunohistochemistryIHC：免疫组织化学IHC是一种利用抗原抗体特异性结合原理来检测组织样本中特定蛋白质的技术。在IHC实验中，组织切片会被暴露于针对目标抗原的特异性抗体之下，随后使用标记的。

WB杂出来的actin为什么两条带
　　WBWesternBlot杂出来的actin出现两条带的原因如下：蛋白亚型表达：一种蛋白有时检测压型很明显，有时不是很明显。参考了很多文献的结果，均有此种情况出现，即使是大家都觉得很确定的蛋白很多时候也会出现不同的亚型。毕竟对很多蛋白我们的认识有限。实验技术：曝光的时候。

用什么方法探知细胞内蛋白质表达水平
　　过量摄入蛋白质，将会因代谢障碍产生蛋白质中毒甚至于死亡。必需氨基酸和非必需氨基酸食物中的蛋白质必须经过肠胃道消化，分解成氨基。s症等都是由于蛋白质折叠异常引起的疾病。蛋白质如何在细胞内正确地折叠？为什么这个过程有时会失败？过去四十年间关于蛋白质折叠过程。

WesternBlot为什么必须要用内参
　　还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。在WesternBlotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检。

ImageJ软件分析westernblot条带的求助急
　　蛋白质的表达水平。以下是详细的步骤：打开ImageJ软件，进入软件主页。导入WB条带图片：File→Open→找到WB条带。把图片转化成灰度。直至所有条带都被测量。当测定完所有条带，选结果中的“Edit”的“SelectAll”，然后复制数据“IntDen”到Excel表即可进行分析。也可以直。

WesternBlot为什么必须要用内参
　　还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。在WesternBlotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测。

做wb的bax和bcl2的目的蛋白时会出现时间长的细胞凋亡而导致内参出
　　因为理论上来讲βactin在膜上是不表达的。WB能做出βactin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而，如果我们试验目的是用药物。做内参似乎就不妥了，因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话，βactin就是检测不到的。

新手进实验室才两周现在要测某种基因的时空表达该怎么入手呢
　　新手测量基因时空表达的步骤作为一名新手，进入实验室并着手测量某种基因的时空表达可能会感到有些不知所措。以下是基于给定搜索结果。蛋白水平分析：如果需要进一步验证基因表达的结果，可以进行蛋白质水平的分析，如WesternBlottingWB或免疫组化IHC等实验。以上步骤。