凝胶过滤得到的蛋白质相对分子质量是SDSPAGE测得的2倍

未知蛋白质分子量范围如何进行测定
　　有SDS-PAGE电泳法、高效液相凝胶过滤色谱法、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法这三种方法可以测定未知蛋白质分子量范围。SDS-PAGE电泳法SDS-PAGE是一种常用的方法，用于分离和测定蛋白质的分子量。在还原条件下，SDS会与蛋白质结合，掩盖其原有的电荷差异，使得。

SDS电泳后不见条带怎么回事有泳道蛋白没有问题点样没有问题
　　SDS电泳后不见条带可能是因为以下几个原因：染色问题：蛋白marker没有染出来，可能是染色液出了问题。需要重新配制染色液，并过滤后再进。需要根据凝胶浓度和蛋白分子量选择合适的跑胶时间。样品处理问题：在前期处理过程中可能损失了目标蛋白质本身。需要检查样品处理过程。

简答题简述几种测定蛋白质分子量的方法及原理
　　1沉降速度法利用超速离心机；#2凝胶过滤法利用一种葡聚糖凝胶，但用洗脱液时，被排阻的相对分子质量大的分子，先被洗脱下来，相对分子小的从大到小依次#3SDS聚丙烯酰胺凝胶液电脉法各蛋白质分子大小不同电泳不同

蛋白质的纯化实验
　　然后可以采用各种方法对蛋白质进行分离，如离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析、透析等。分离方法的选择应根据样品特性和需求进行综合考虑。纯化和检测：通过上述步骤分离出的蛋白质可能仍存在着杂质，因此还需要进行纯化和检测。常用的检测方法包括SDS-PAGE、Weste。

未知蛋白质分子量范围如何进行测定
　　方法1：SDSPAGE电泳，通过加入的蛋白Marker各条带迁移率和未知蛋白的条带迁移率，再用软件可计算出来。方法2：凝胶过滤层析：用一系列已知分子量的标准品放入同一凝胶柱内，在同一条件下层析，记录每一分钟成分的洗脱体积，并以洗脱体积对分子量的对数作图，在一定分子量范围内可。

蛋白质提取方法
　　如TritonX-100或SDS，可以瓦解细胞膜，释放细胞内的蛋白质。有机溶剂沉淀法利用有机溶剂如乙醇、丙酮等沉淀蛋白质，适用于提取与脂质结。凝胶过滤层析法根据蛋白质分子大小的不同进行分离，常用的凝胶介质有Sephadex和Superdex等。亲和层析法利用蛋白质与特定配体之间的。

蛋白质的理化性质有哪些在蛋白质的分离纯化中有何作用
　　蛋白质主要的理化性质以及对应的分离纯化方法如下：电荷Charge：等电聚焦isoelectricfocussing离子交换IonExchange等电点沉淀Isoe。分子量MolecularWeight：透析Dialysis超滤Ultrafiltration凝胶过滤GelfiltrationSDSPAGE电泳Electrophoresis溶解度Solubility：盐析Saltout有机。

利用了蛋白质带电性质大分子性质分离纯化蛋白质的方法各有哪些
　　利用了蛋白质带电性质：电泳、离子交换层析；利用大分子性质：透析、超滤、凝胶过滤。定量测定：测定蛋白质溶液的A280、定氮法；分子量测定：SDSPAGE、超速离心法。

DTT溶液怎么配用于蛋白质凝胶电泳的上样buffer
　　1、1mol/lDDT溶液配制方法：用20ml0.01mol/L乙酸钠溶液pH5.2溶解3.09gDTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于20℃。注意：DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。2、SDS样品缓冲液：SDS100mg，巯基乙醇0.1ml，甘油1ml，溴酚蓝2mg，加入0.2mol/lpH7.2磷酸盐缓冲液0.5ml溶解；

蛋白质提取问题
　　透析或超滤：如果需要改变蛋白质的浓度或去除小分子杂质，可以使用透析袋或超滤装置来进行体积置换。层析：根据蛋白质的性质如大小、电荷、亲和力等，可以选择不同的层析技术如凝胶过滤、离子交换、亲和层析或反相高效液相色谱来进行进一步的纯化。浓缩和保存：最后，可以。